分配色谱法
固定相与流动相均为液体(互不相溶);
1.基本原理:组分在固定相和流动相上的分配
2.流动相:对于亲水性固定液,采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定液的极性(正相 normal phase),反之,流动相的极性大于固定液的极性(反相 reverse phase)。正相与反相的出峰顺序相反;
3.固定相:早期涂渍固定液,固定液流失,较少采用;
化学键合固定相:将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶(担体)表面的游离羟基上。C-18柱(反相柱)。
分配色谱法是液相色谱法中应用zui广泛的一种。它类似于溶剂萃取,溶质分子在两种不相混溶的液相即固定相和流动相之间按照它们的相对溶解度进行分配。一般将分配色谱法分为液液色谱和键合相色谱两类。
液液色谱的固定相是通过物理吸附的方法将液相固定相涂于载体表面。在液液色谱中,为了尽量减少固定相的流失,选择的流动相应与固定相的极性差别很大。由此人们将固定相为极性,流动相为非极性的液相色谱称为正相液相色谱;相反的称为反相液相色谱。
键合相色谱的固定相是通过化学反应将有机分子键合在载体或硅胶表面上。目前,键合固定相一般采用硅胶为基体,利用硅胶表面的硅醇基于有机分子之间成建,即可得到各种性能的固定相。一般来说,键合的有机基团主要有两类:疏水基团、极性基团。疏水基团有不同链长的烷烃(C8和C18)和 苯基等。极性基团有丙胺基、氰乙基、二醇、氨基等。与液液色谱类似,键合相色谱也分为正相键合相色谱和反相键合相色谱。